吡咯喹啉醌对氧化应激诱导雪旺细胞凋亡的保护作用及其机制

摘要

目的探讨吡咯喹啉醌（Pyrroloquinoline quinine,PQQ）对H2O2诱导雪旺细胞（Schwann cells,SCs）凋亡的保护作用及其作用机制。方法体外原代培养、纯化及S-100免疫荧光染色鉴定SCs,将培养SCs分为空白对照组、H2O2处理组（100μmol/L H2O2诱导组）、H2O2加PQQ处理组（10、50和100 nmol/L PQQ处理组）。检测各组细胞内超氧化物歧化酶（SOD）及丙二醛（MDA）的含量,流式细胞仪计数检测SCs早期凋亡率,Hoechst33342染色观察凋亡SCs核碎裂及核固缩情况,亲脂性阳离子荧光染料罗丹明染色（Rhodamine123,Rho123）观察凋亡SCs线粒体膜电位变化情况,Western blot法检测Bcl-2的表达水平。结果经H2O2诱导,SCs组与空白对照组比较SOD含量明显减少,MDA含量明显增加（P＜0.05）;加入PQQ后SOD含量增加,MDA含量减少（P＜0.05）。流式细胞仪检测结果表明,经H2O2诱导SCs早期凋亡率为58.8%,与空白对照组（2.1%）比较差异有统计学意义（P＜0.05）,加入10、50、100 nmol/L PQQ后凋亡率分别降低为33.7%、18.7%、3.9%,差异有统计学意义（P＜0.05）。Hoechst33342染色结果表明,H2O2诱导SCs具有典型的凋亡形态特征,表现为核染色质浓聚、细胞核体积缩小、核碎裂现象明显,经PQQ作用后凋亡形态细胞比例减少。Rho123染色结果表明,经H2O2诱导后SCs线粒体膜电位明显降低,而经PQQ作用后部分逆转。Western blot结果表明,经H2O2诱导SCs后Bcl-2表达下调,加入PQQ后Bcl-2表达有所增加,差异有统计学意义（P＜0.05）。结论 PQQ对氧化损伤SCs凋亡具有保护作用。