抗柯胶囊总皂苷对柯萨奇病毒B型诱导细胞凋亡的抑制作用

摘要

目的观察抗柯胶囊总皂苷抑制柯萨奇病毒B型(CVB)诱导细胞凋亡的作用,探讨其可能的机制。方法通过接种病毒液的方式建立体外细胞感染模型,采用细胞病变效应法(CPE)测定抗柯胶囊总皂苷对CVB_(3)、CVB_(4)、CVB_(5)株50%抑制浓度(IC_(50))及治疗指数(TI);CCK-8试剂盒检测细胞存活情况;TdT介导的dUTP缺口末端标记技术(TUNEL法)测定心肌细胞凋亡率;蛋白免疫印迹法(Western-blot)检测大鼠原代心肌细胞中Bcl-2、Bax蛋白表达情况。结果抗柯胶囊总皂苷可明显抑制CVB_(3)、CVB_(4)、CVB_(5)致细胞病变,对CVB_(3)、CVB_(4)、CVB_(5)的IC_(50)分别为223.34、315.48、306.53μg·mL^(-1),治疗指数分别为4.68、3.24、3.24;390.63、195.32、97.66μg·mL^(-1)剂量组可明显提高3种病毒感染后心肌细胞的存活率,抑制心肌细胞凋亡。抗柯胶囊总皂苷对CVB_(3)病毒复制有明显抑制作用,390.63、195.32μg·mL^(-1)2个剂量组可使凋亡关键因子Bcl-2表达增加,Bax表达降低,Bcl-2/Bax比值升高,与病毒对照组比较有显著差异(P<0.05,P<0.01)。结论抗柯胶囊总皂苷可以改善CVB致心肌细胞病变,提高细胞存活率,减少细胞凋亡,其机制与抑制病毒复制、调控心肌细胞中凋亡相关蛋白表达相关。