缺氧诱导丝裂原因子对胎肺形态发育及表面活性蛋白表达的影响

摘要

目的探讨缺氧诱导丝裂原因子（hypoxia-induced mitogenic factor,HIMF）对胎肺形态发育及表面活性蛋白 B（sudactant protein B,SP-B）、表面活性蛋白 C（surfactant protein C,SP-C）表达的调控作用。方法体外分离、培养小鼠第13.5天胎肺组织,分为 HIMF 处理组:在培养基中添加重组HIMF 蛋白,终浓度为100 nmol/L;对照组培养基中不加任何处理。分别在培养0、48、72 h 后,每组每时间点选取20例胎肺采用倒置显微镜和 HE 染色观察胎肺形态学和组织学的改变,采用 Western 印迹、免疫组化、实时逆转录-聚合酶链反应技术检测胎肺组织中 SP-B 和 SP-C 的蛋白、mRNA 表达水平变化。结果 HIMF 处理组培养48、72 h 后,肺泡数目分别为（14.37±0.85）和（18.41±1.24）个/高倍视野,肺泡分支的数目分别为（2.51±0.35）和（3.28±0.51）个/高倍视野,均较对照组相应时间点[分别为（8.09±0.92）、（9.54±0.78）、（1.45±0.32）和（1.69±0.43）个/高倍视野]增加,差异有统计学意义（P＜0.05）。对照组胎肺体外培养72 h 后,SP-B、SP-C 蛋白表达较少,染色强度弱,主要定位于Ⅱ型肺泡上皮细胞;HIMF 处理组可见Ⅱ型肺泡上皮细胞内 SP-B、SP-C 弥漫表达,以靠近肺组织边缘为甚。HIMF 处理组培养48和72 h 后,胎肺组织中 SP-B、SP-C 蛋白和 mRNA 水平均较对照组相应时间点增加,差异有统计学意义（P＜0.05）。结论 HIMF 可能通过上调胚胎组织中 SP-B 和 SP-C 的表达,促进胎肺形态发育,为进一步研究 HIMF 在胚胎肺泡发育和成熟中的作用奠定了基础。