牛磺酸促进生长受限胎鼠神经干细胞增殖

摘要

目的探讨牛磺酸对胎儿生长受限（fetal growth restriction,FGR）胎鼠神经干细胞（neural stem cell,NSC）增殖的影响。方法采用全程饥饿法,即仅给予对照组孕鼠正常饮食的40%制作FGR模型。将进行体内实验的SD孕鼠随机分为对照组5只、FGR组7只、牛磺酸组6只（FGR+牛磺酸）,牛磺酸组除接受全程饥饿外,灌胃补充牛磺酸300 mg/（kg·d）,自孕7 d开始至自然分娩。分娩后称取各组新生鼠出生体重、脑重;采用免疫组化检测各组新生鼠脑组织NSC中脂肪酸结合蛋白-7（fatty acid binding protein-7,FABP-7）的表达。将进行体外实验的孕鼠随机分为对照组和FGR组,造模方法同前,于孕14.5 d体外分离胎鼠NSC,培养5 d后,采用免疫荧光细胞化学染色法检测FABP-7在原代NSC中的表达;用不同浓度的牛磺酸（5、10、15、20、30、40 mmol/L）处理NSC,采用CCK8试验检测各组细胞的增殖能力,计数各组单细胞。采用单因素方差分析、Kruskal-Wallis秩和检验、SNK检验和Tamhane’s检验进行统计学分析。结果 FGR组新生鼠脑组织FABP-7阳性细胞面积（10 173±1 728）明显低于对照组（18 012±3 016）,牛磺酸组新生鼠脑组织FABP-7阳性细胞面积（19 518±3 201）明显增加（F=200.8,P＆0.05）。对照组和FGR组胎鼠均可分离培养出具备形成神经球能力的NSC,各组神经球均可表达FABP-7;细胞增殖能力检测显示,对照组增殖指数为1时,FGR组、FGR+5 mmol/L牛磺酸组、FGR+10 mmol/L牛磺酸组、FGR+15 mmol/L牛磺酸组、FGR+20 mmol/L牛磺酸组、FGR+30 mmol/L牛磺酸组、FGR+40 mmol/L牛磺酸组胎鼠NSC增殖指数分别为0.80±0.07、0.92±0.11、1.33±0.24、1.20±0.15、1.11±0.14、0.80±0.12和0.82±0.08,两两比较结果显示10、15、20 mmol/L浓度的牛磺酸组胎鼠NSC增殖指数明显高于FGR组（P均＆0.01）。对照组、FGR组、不同浓度牛磺酸组所得总细胞数依次为（24.50±0.60）×105、（20.23±1.09）×105、（22.80±0.86）×105、（27.53±1.22）×105、（25.30±1.05）×105、（22.70±0.72）×105、（21.81±1.80）×105和（18.06±0.90）×105,两两比较结果显示5、10、15、20 mmol/L浓度的牛磺酸组所得总细胞数明显高于FGR组（P＆0.01或0.05）,而40 mmol/L浓度的牛磺酸组所得总细胞数低于FGR组（P＆0.05）。结论 FGR胎鼠脑内NSC数量明显减少及体外增殖能力明显降低,产前补充牛磺酸可明显增加FGR胎鼠脑内NSC的数量及促进NSC体外增殖,且以10 mmol/L浓度促增殖效果较好。