siRNA下调AEG-1表达对神经母细胞瘤细胞MMP-9的表达及侵袭能力的影响

摘要

目的观察下调Astrocyte elevated gene-1（AEG-1）基因对神经母细胞瘤细胞中基质金属蛋白酶9（MMP-9）表达以及细胞侵袭能力的影响。方法根据RNA干扰原理,设计合成AEG-1siRNA。通过荧光定量RT-PCR和Western blotting观察神经母细胞瘤细胞中AEG-1基因mRNA和蛋白下调情况;采用Western bloting观察下调AEG-1表达对神经母细胞瘤细胞中MMP-9蛋白表达的影响;通过侵袭实验（Transwell法）观察下调AEG-1表达对神经母细胞瘤细胞侵袭能力的影响。结果采用AEG-1 siRNA转染神经母细胞瘤细胞,下调细胞内AEG-1的mRNA和蛋白表达（P＜0.05）后MMP-9蛋白表达抑制率分别为63.1%和58.9%。此外下调AEG-1表达使细胞侵袭能力明显减弱（P＜0.05）。结论 AEG-1基因下调使神经母细胞瘤细胞中MMP-9的蛋白表达明显减少、活性明显减弱,同时使细胞的侵袭能力降低。由此可见AEG-1在肿瘤细胞的侵袭转移中可能扮演重要角色,将会成为神经母细胞瘤基因治疗的新靶点。