生长激素诱导心肌细胞外信号调节酶激活及其上游调控

摘要

目的和方法:用生长激素(GH)刺激培养的新生大鼠心肌细胞,用含MBP凝胶分离法测定细胞外信号调节酶(ERKs)活性,用Whatman Paper Filter法测定Raf-1活性,观察GH是否激活心肌细胞Raf-1-ERK级联反应.观察负显突变Ras质粒(D.N.Ras)与HA-ERK2质粒复合转染或有关抑制剂对GH诱导ERK激活的影响.结果:GH以时间和浓度依赖性方式激活心肌细胞ERK1和ERK2.ERK上游调节酶Raf-1活性也升高.过度表达D.N.Ras明显抑制GH诱导的心肌细胞HA-ERK2激活.Ras特导性抑制剂manumycin也显著阻断GH诱导的心肌细胞ERK激活.而分别用TPA和Calphostin C耗竭和抑制心肌细胞PKC,均未阻断GH对ERK的激活作用.结论:GH激活心肌细胞的Raf-1-ERK级联反应,这种激活依赖上游Ras,而不受PKC活性和含量变化的影响.