Rhodopsin和S-opsin在MNU诱导的大鼠视网膜损伤过程中的表达变化

摘要

目的:观察在N-甲基-N亚硝酸脲(MNU)诱导的大鼠视网膜外核层细胞损伤过程中视紫质(rhodopsin)和蓝光视蛋白(blue-sensitive opsin/S-opsin)在视网膜中的表达变化,分析其与MNU诱导的视网膜损伤的关系. 方法:将30只SPF级50 d龄雌性SD大鼠随机分为正常对照组和MNU模型1、3、7、10 d 组,每组各6只大鼠.模型组以腹腔注射MNU(40 mg/kg)建立MNU模型;正常对照组大鼠腹腔注射生理盐水(5 mL/kg).右眼冰冻切片行苏木素-伊红(HE)染色判断视网膜损伤程度.通过逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)和免疫荧光检测各组视网膜中rhodopsin和S-opsin的mRNA及蛋白表达情况.结果:病理检测确定造模结果与以往实验一致,各组病理分级之间的差异显著(2=16.838,P<0.01).RT-PCR检测结果表明,与正常对照组相比,各MNU模型组rhodopsin和S-opsin的mRNA表达水平随MNU作用时间增加而逐渐降低且差异均显著(rhodopsin 1 d 组P<0.05;S-opsin 1 d组P<0.01;3、7、10 d 组rhodopsin和S-opsin均P<0.01).免疫荧光检测结果显示,在正常大鼠视网膜rhodopsin主要在光感受器细胞外段表达,MNU作用后rhodopsin主要在外核层表达,少量在内核层表达,并随MNU作用时间增加而逐渐表达降低.S-opsin在正常视网膜各层均有表达,在各模型组随MNU作用时间增加S-opsin的表达逐渐降低,在外核层和光感受器细胞内、外段尤为明显.结论:MNU诱导的视网膜外核层细胞损伤可降低rhodopsin和S-opsin的表达,并与MNU选择性引起光感受器细胞丧失有关.