KAI1 RNA探针的制备及其在胰腺癌中的应用

摘要

目的 制备DIG标记KAIl RNA探针和分析KAIl基因在胰腺癌中的表达。方法 以线性KAIl基因DNA质粒为模板,采用体外转录法掺入DIG-11-UTP制备RNA探针,并通过化学发光法检测。应用该探针通过Northern blot对12例正常胰腺组织和30例原发性胰腺癌组织中的KAIl基因mRNA进行分析。结果 该方法标记的KAIl RNA探针浓度为1 ug/μl时即可检测。Northern bolt分析发现25例无转移的胰腺癌中KAIl基因在2.4kb处存在明显的杂交信号,5例发生转移的晚期胰腺癌杂交信号较弱,正常胰腺组织中该基因的表达水平呈阴性或弱阳性。结论 本法标记的KAIl RNA探针灵敏度高,KAIl基因低表达与胰腺癌的转移有关。