TW-37调节NF-κB信号通路抑制体外胰腺癌细胞转移的实验研究

摘要

目的观察TW-37干预对胰腺癌细胞增殖、凋亡、侵袭及血管生成的影响,探讨其可能机制。方法应用TW-37干预胰腺癌细胞株BxPC3和HPAC,以转染NF-κB p65 cDNA（p65 cDNA）、靶向NF-κB p65的siRNA（siRNA-p65）细胞及未干预细胞作为对照组。采用MTT和ELISA法检测细胞增殖和细胞凋亡;应用Transwell小室检测细胞侵袭能力;采用体外人脐静脉内皮细胞（HUVECs）成管实验观察细胞培养上清对血管生成的影响;ELISA法检测细胞NF-κB活性;蛋白质印迹法检测细胞NF-κB靶向调节蛋白VEGF、MMP-9表达。结果 TW-37呈浓度和时间依赖性抑制BxPC3、HPAC细胞的增殖,诱导两株细胞的凋亡(A405值1.29±0.21比0.09±0.01,1.07±0.18比0.08±0.01),抑制细胞NF-κB活性及NF-κB p65、VEGF、MMP-9蛋白表达,差异均有统计学意义（P值均＜0.05）。对照组、0.75μmol/L TW-37干预组的穿膜细胞数分别为（46.7±5.24）、（10.3±1.26）个/200倍视野;HUVECs形成的血管数分别为（39.4±4.36）、（7.84±1.25）个/200倍视野,差异均有统计学意义（P值均为0.001）。转染p65 cDNA的两株细胞的NF-κB活性较对照组显著增加,用TW-37干预后NF-κB活性下降;转染siRNA-p65的两株细胞的NF-κB活性较对照组显著下降,用TW-37干预后NF-κB活性进一步下降,差异均有统计学意义（P＜0.05或＜0.01）。转染p65 cDNA对两株细胞凋亡无明显影响,用TW-37干预后凋亡略有变化;转染siRNA-p65的两株细胞凋亡显著增加,用TW-37干预后又进一步增加,差异均有统计学意义（P值均＜0.01）。结论TW-37通过NF-κB抑制胰腺癌细胞增殖、侵袭和血管生成,诱导细胞凋亡。