左、右归丸对去卵巢大鼠骨髓间充质干细胞成骨分化的影响

摘要

目的基于AMPK/mTOR信号通路探讨左、右归丸对去卵巢大鼠骨髓间充质干细胞成骨分化的影响及作用机制。方法将60只雌性大鼠随机分为六组,其中一组为空白对照(KB组);一组模拟手术过程,灌胃蒸馏水(SHAM组);其余四组进行卵巢切除术,分别灌胃蒸馏水(OVX组)、补佳乐(BJL组)、右归丸(YGW组)和左归丸(ZGW组)。12周后取大鼠股骨和胫骨骨髓间充质干细胞培养,并进行成骨分化诱导,采用流式细胞仪进行细胞鉴定;用碱性磷酸酶(ALP)活性检测试剂盒检测ALP活性;通过茜素红染色法观察矿化结节的形成;通过Western blotting法检测Runx 2、AMPKɑ、p-AMPKɑ、mTOR、p-mTOR、p70S6K1、p-p70S6K1蛋白的表达。结果左、右归丸能显著提高去卵巢大鼠骨髓间充质干细胞成骨诱导后ALP活性,促进成骨诱导后矿化结节的形成,提高Runx 2蛋白的表达。与KB组比较,OVX组AMPKɑ蛋白磷酸化水平升高,mTOR与p70S6K1蛋白磷酸化水平皆降低;三个用药组皆能对抗上述改变。结论左、右归丸均能促进BMSCs的成骨分化,其作用机制可能是通过AMPK/mTOR信号通路影响了BMSCs的成骨分化。