利用骨髓基质细胞体内异位成骨的实验研究

摘要

骨组织工程的最终目的在于形成新的骨组织并用于骨缺损的修复。以往的实验显示骨髓基质细胞(Bone marrow stromai cell,BMSc)是骨组织工程的良好细胞来源。本实验将BMSc与玻璃陶瓷(Bioactive glass ceramic,BGC)复合培养后植入体内,以观察其在体内成骨的过程和能力。 一、材料和方法 1.BGC生物材料制备: 将BGC(孔径0.1um～1.0um,孔隙率30％～40％,中科院成都光电研究所提供)切割成4mm×4mm×2mm大小长方形块状物,超声波震荡,三蒸水清洗浸泡2次,烘干,高温高压灭菌后备用。 2.取材及细胞培养: 自新西兰大白兔(第一军医大学动物实验中心提供,雌雄不限,2.0kg～2.5kg),股骨大转子部抽吸骨髓共3ml,反复抽吸吹打。制成单细胞悬液,以3×10~6/ml细胞数接种入50ml培养瓶中,置于37℃、5％CO_2孵箱中,待细胞汇合成单层后消化,使用条件培养基(1640完全培养基中加入地塞米松10mol/L～8mol/L、β-甘油磷酸钠10mmol/L)进行传代培养。 3.BGC与BMSc的体外复合培养: 将传至第三代的BMSc以5×10~5/ml种植于灭菌单纯BGC材料上,联合培养72小时后取出,植入体内。 4.植入方法: 每只兔右侧植入单纯材料,左侧植入BMSc与BGC复合培养体。 兔耳缘静脉麻醉(3％戊巴比妥钠,