成纤维细胞生长因子1型受体-显性失活作用对骨诱导培养骨髓基质干细胞矿化的影响

摘要

目的 探讨成纤维细胞生长因子1型受体-显性失活作用(FGFR1DN)对骨诱导培养骨髓基质干细胞(BMSCs)成骨矿化的影响. 方法 取第3代BMSCs转染,根据细胞转染方法不同分为4组(n=24):FGFR1-DN组[采用真核表达质粒pcDNA3.1(+)-FGFR1DN转染]、FGFR1组[采用pcDNA3.1(+)-FRFR1转染]、空载体转染组和未转染组.证实转染成功后,待细胞处于对数生长期时进行成骨诱导培养,连续培养21 d,观察矿化结节形成情况并行茜素红染色,然后根据茜素红浓度标准曲线计算矿化物质的量. 结果 连续成骨诱导21d后,肉眼可见孔底圆形不透明钙化结节,经茜素红染色后呈红色,FGFR1-DN组BMSCs在对数生长期经成骨诱导培养,其成骨能力明显增加,而FGFR1组成骨能力减弱.茜素红浓度含量FGFR1-DN组最高(1.33±0.19),FGFR1组最低(1.00±1.17),空载体转染组(1.20±0.16)和未转染组(1.17 ±0.17)介于二者之间,组间比较差异有统计学意义(P＜0.05).结论 FGFR1-DN在BMSCs分化的早期可以促进细胞增殖,于对数生长期进行骨诱导培养后实现了其在成骨细胞中促进矿化的作用,这为局部基因治疗骨折骨缺损提供了理论依据.