反义肽核酸下调树突状细胞CCR7基因表达抑制大鼠肝移植急性排斥反应

摘要

目的研究反义肽核酸（PNA）下调树突状细胞（DC）趋化因子受体CCR7基因表达在大鼠肝移植急性排斥反应中的作用。方法体外培养大鼠骨髓来源的DC,设计靶向CCR7 mRNA翻译起始区的反义PNA组,以随机PNA组和空白组为对照。免疫细胞化学染色法检测反义PNA对CCR7蛋白表达的影响;趋化试验检测DC的趋化活性。建立大鼠肝移植排斥反应模型,在供肝冷保存和肝移植术后应用反义PNA,以随机PNA组和空白组为对照,观察术后受者存活时间。于术后第7、10天取移植物标本观察肝脏病理学改变;免疫组织化学染色法检测淋巴结DC数量变化以及T淋巴细胞的活化增殖情况。结果反义PNA显著下调体外培养的DC表达CCR7蛋白,DC体外趋化活性受到明显抑制,与随机PNA组和空白组相比,差异有统计学意义（P＜0.05）。肝移植术后,反义PNA组与随机PNA组和空白组相比,受者腹腔淋巴结中DC数量明显减少,T淋巴细胞活化增殖受到显著抑制,受者术后存活时间明显延长（P＜0.05）。结论通过反义PNA下调CCR7基因表达,阻断DC迁移和抗原提呈,能有效抑制急性排斥反应,延长受者存活时间。