不同细胞接种密度及饥饿对RAW264.7诱导分化的影响

摘要

目的:研究不同细胞接种密度及饥饿对小鼠单核细胞RAW264.7诱导分化的影响.方法:RAW264.7细胞按5000/孔、1万/孔、2万/孔及4万/孔接种到48孔板,饥饿组饥饿12小时后用50ng/ml RANKL诱导RAW264.7细胞四天后,用抗酒石酸酸性磷酸酶(TRAP)染色法观察TRAP阳性多核细胞,用倒置显微镜观察多核细胞形态,非饥饿组正常培养12小时后用RANKL诱导观察.结果:光镜观察TRAP阳性多核破骨细胞(≥3个核)并计数,5000/孔饥饿组阳性多核细胞最多,非饥饿相对减少;1万/孔及2万/孔饥饿组较5000/孔饥饿组阳性多核细胞相对减少,但明显多于非饥饿组;4万/孔饥饿、非饥饿组少见阳性多核细胞.结论:RAW264.7细胞接种密度越低,50ng/ml RANKL诱导效果越好;RAW264.7细胞饥饿12小时后.50ng/ml RANKL诱导效果优于非饥饿组