米诺环素对压力作用下体外培养神经细胞凋亡的抑制

摘要

目的在开放式压力控制培养系统作用下体外培养大鼠视网膜神经细胞（retinal neurons,RNs）,观察米诺环素对其活性及凋亡的影响．并进—步探讨其对受损RNs保护的可能机制．方法采用出生0-3d的Sprague Dawlev（SD）大鼠视网膜神经细胞体外混合培养。制备RNs加压培养模型．通过细胞形态学观察,四唑盐（MTT）比色法测定细胞活力，吖啶橙／溴化乙锭（AO／EB）染色法检测细胞的凋亡率来观察米诺环素对上述损伤细胞的保护及治疗作用．以及应用免疫细胞化学染色法。观察诱导型一氧化氮台酶（iNOS}和半胱天冬酶-3,（caspase-3）表达的改变、结果 加压培养后,在倒置显微镜下RNs与对照组相比形态改变较咀.细胞活力降低，大量细胞发生凋亡（占53.93％）.而米诺环素治疗组（20μmol／L）细胞则形态改善．活力显著增高：凋亡数目减少（占17．29％）．差异具有显著性（P〈0.0051）。免疫细胞化学染色法示米诺环素治疗组细胞内NOS和caspase-3表达较加压损伤组减少。结论 一定剂量的米潜环素在体外可有效抑制蓝力。引起的大鼠视网膜神经细胞损伤及凋亡。抑制NOS和capase-3的表达可能是其潜在作用机制。