用于青光眼基础研究的开放式压力控制培养系统的研制

摘要

目的设计、组装开放式压力控制培养系统,研究该系统对培养液pH值、碳酸氢根（HCO3-）浓度、氧气分压（pO2）、二氧化碳分压（pCO2）及视网膜色素上皮细胞增殖的影响,评价该系统在青光眼基础研究中应用的可行性。方法采用动态循环气体控制压力的方法,设计组装开放式压力控制培养系统。比较正常压力细胞培养系统（37℃恒温培养箱,5%CO2浓度）、开放式压力控制培养系统、密闭压力控制培养系统对DMEM/F-12培养液pH值、HCO3-浓度、pO2、pCO2的影响。采用MTT法比较3种培养系统对人视网膜色素上皮细胞增殖能力的影响。结果成功组装开放式压力控制培养系统,通过调节进出气流速度,可将培养瓶内压力控制在0~100mmHg（1mmHg=0·133kPa）之间。培养24h测定结果:开放式与正常压力细胞培养系统组比较,其pH值（P=0·927）、HCO3-浓度（P=0·887）、pO2（P=0·818）、pCO2（P=0·770）、A值（P=0·719）差异均无统计学意义;密闭组与正常压力细胞培养系统组比较,前者pH值升高（P=0·001）,HCO3-浓度（P=0·000）,pO2（P=0·000）、pCO2（P=0·000）、A值（P=0·000）降低。结论开放式压力控制培养系统设计、组装成功,可以实现对培养环境压力及培养液pH值、HCO3-浓度、pO2及pCO2的均衡调控。相对于密闭压力控制培养系统,该系统可以排除培养条件差异对研究结果的影响。标准化的开放式压力控制培养系统有望为青光眼体外研究提供理想实验模型。