衰老标记蛋白30高表达对紫外线诱导人晶状体上皮细胞凋亡的影响

摘要

目的探讨衰老标记蛋白30（SMP-30）高表达对于紫外线B（UVB）诱导人晶状体上皮细胞凋亡的影响。方法实验研究。以人晶状体上皮细胞系（HLE-B3）为模型, 构建真核质粒pRFP-N1-SMP-30, 利用脂质体转染的方法将其导入不同分组的细胞中, 并以UVB刺激, 用MTT法检测高表达的SMP-30对UVB诱导的HLE-B3细胞生存力的影响;利用细胞凋亡检测试剂盒测定高表达的SMP-30对UVB诱导的HLE-B3细胞凋亡的作用;并用免疫印迹法验证高表达的SMP-30对UVB诱导的凋亡相关蛋白表达的影响, 通过活性氧自由基水平的检测分析高表达的SMP-30对UVB诱导的HLE-B3细胞活性氧表达的作用。数据的分析选择方差分析联合Dunnett的统计学方法。结果 DNA测序证实插入的序列正确, 证明pRFP-N1-SMP-30质粒构建成功。UVB照射后SMP-30高表达组HLE-B3细胞生存率为0.90±0.14, 细胞的凋亡率为0.43±0.06, 活性氧的水平0.52±0.02, 与对照组相比差异均有统计学意义（t=5.830, 9.934, 12.19;P＆0.05）。UVB处理后, SMP-30高表达可显著下调Bax和cleav-caspase-3的表达, 同时上调Bcl-2和Pro-caspase-3的表达。结论高表达的SMP-30通过调控凋亡相关蛋白的表达及抑制活性氧的产生来缓解UVB照射导致的人晶状体上皮细胞的凋亡, 从而发挥对晶状体上皮细胞的保护作用。（中华眼科杂志, 2017, 53:835-841）