低剂量重离子束照射对胰腺癌患者外周血淋巴细胞亚群比例和细胞因子表达的影响

摘要

目的研究低剂量重离子束(12C6+)照射对胰腺癌患者外周血淋巴细胞（PBL）亚群比例和细胞因子表达的影响。方法采集21例胰腺癌患者的PBL,每例患者标本分为假照组、X线照射组（0.05 Gy）和12C6+照射组（0.05 Gy）进行照射。照射后24 h,采用流式细胞仪检测T细胞与NK细胞亚群比例变化,采用实时定量PCR法检测白介素2（IL-2）、γ干扰素（IFN-γ）和肿瘤坏死因子α（TNF-α）mRNA的表达,采用酶联免疫吸附试验检测IL-2、IFN-γ和TNF-α蛋白的表达水平。结果12C6+照射组外周血中CD3+T细胞、CD3+CD4+T细胞和CD3+CD8+T细胞的比例分别为（67.15±4.36）%、（19.02±2.35）%和（46.59±6.07）%,X线照射组外周血中CD3+T细胞、CD3+CD4+T细胞和CD3+CD8+T细胞的比例分别为（60.81±8.35）%、（17.21±2.86）%和（41.18±6.35）%,均明显高于假照组（均P＜0.05）。但假照组、X线照射组和12C6+照射组CD3+CD4+T细胞与CD3+CD8+T细胞的比值分别为0.67、0.65和0.68,差异无统计学意义（P＞0.05）。与假照组比较,X线照射组和12C6+照射组外周血中CD3-CD16+NK细胞、CD3-CD56+NK细胞和CD16+CD56+NK细胞的比例均未发生明显变化（均P＞0.05）。12C6+照射组外周血淋巴细胞中IFN-γ和IL-2mRNA表达量的Ct值分别为23.35±3.16和24.19±3.56,X线照射组外周血淋巴细胞中IFN-γ和IL-2 mRNA表达量的Ct值分别为27.25±2.15和27.85±4.08,与假照组的差异均有统计学意义（均P＜0.05）;但TNF-αmRNA在各组间的表达差异无统计学意义（P＞0.05）。假照组、X线照射组和12C6+照射组外周血淋巴细胞中IFN-γ、IL-2和FNF-α蛋白的表达与mmRNA的表达趋势一致。结论低剂量重离子束照射能明显减轻胰腺癌患者的免疫抑制,且较传统的X线照射有更大的优势。T细胞亚群和细胞因子的表达水平可作为低剂量辐射效应的评价指标。