不同雌激素受体表达状态的子宫内膜癌细胞中转录因子的活性分析

摘要

目的分析并比较不同雌激素受体（ER）表达状态的子宫内膜癌细胞中转录因子的活性。方法采用实时荧光定量 RT-PCR 技术检测子宫内膜癌细胞系 RL-952[ERα、ERβ表达均阳性（+）]、HEC-1A[ERα表达弱阳性（±）、ERβ表达阴性（-）]、HEC-1B[ERα、ERβ表达均（-）]细胞中 ERα mRNA 的表达。采用345通量转录因子芯片检测 RL-952、HEC-1A、HEC-1B 细胞中转录因子的活性,采用酶联免疫吸附试验（ELISA）方法检测不同转录活性的转录因子 NFκBp65、p38MAPK 以验证芯片检测结果。结果 ERα mRNA 在 RL-952、HEC-1A、HEC-1B 细胞中表达水平依次递减,分别为（6780±282）、（684±84）、（168±38）copy/ng。转录因子 NFκBp65、p38MAPK 的转录活性采用ELISA 方法检测（分别为2.0±0.4、0.9±0.5,P=0.020）与芯片检测（分别为3003±530、882±538,P=0.017）结果一致。在345个转录因子中,筛选出与 ER 功能相关的差异表达的转录因子共28个,与 ER（+）的 RL-952细胞相比,ER（-）的 HEC-1A、HEC-1B 细胞中转录因子活性同时上调的有13种,同时下调的有15种。转录因子 TTF（1）-1、NRF-1、TCE 的活性与 ERα mRNA 表达水平呈明显线性正相关关系（r=0.523,P=0.037）,而转录因子 RFXl23和 Ikaros 的活性与 ERα mRNA 表达水平呈明显非线性负相关关系（r=-0.312,.P=0.041）。结论转录因子芯片检测是筛选子宫内膜癌致病机制中主要转录因子的先进技术。转录因子 TIT（1）-1、NRF-1、TCE 可能与 ER（+）子宫内膜癌中的信号传导通路相关;转录因子 RFX123和 Ikaros 可能与 ER（-）子宫内膜癌中的信号传导通路相关。