钙敏感受体过表达可促进缺血后未成熟脑白质祖细胞的增殖及分化

摘要

目的探讨钙敏感受体（CaSR）过表达对缺血后未成熟脑白质祖细胞增殖分化的促进作用。方法从5 d龄SD大鼠脑室周围白质组织中提取、培养脑白质祖细胞,并分为对照组、氧糖剥夺（OGD）组、OGD+三氯化钆（GdCl3）组和OGD+CaSR沉默组,其中利用GdCl3特异性激动CaSR表达,利用基因沉默方式抑制CaSR表达。OGD后24 h、48 h、72 h、7 d和14 d,采用实时荧光定量逆转录PCR（RT-qPCR）检测各组细胞中CaSR mRNA水平,采用免疫荧光双标染色检测各组细胞的分化情况;OGD后48 h细胞球形成时,利用倒置显微镜检测细胞增殖情况。结果 （1）CaSR mRNA表达情况:OGD后48 h、72 h、7 d, OGD组细胞内CaSR mRNA表达量均明显高于对照组,差异有统计学意义（P＆0.05）。OGD后48 h、72 h、7 d及14 d,OGD+GdCl3组CaSR mRNA表达量均明显高于对照组及OGD组,OGD+CaSR沉默组CaSR mRNA表达量均明显低于对照组及OGD组,差异均有统计学意义（P＆0.05）。（2）细胞增殖分化情况:OGD后48 h时,OGD组细胞球直径[（75.26±26.07） μm]较对照组[（57.96±18.92） μm]明显增大,OGD+GdCl3组细胞球直径[（91.92±21.82） μm]较对照组及OGD组明显增大,而OGD+CaSR沉默组细胞球直径[（24.09±8.34） μm]较对照组及OGD组明显减小,差异均有统计学意义（P＆0.05）。OGD后48 h、72 h时,OGD组中O4+/CaSR+少突胶质细胞前体细胞（OPCs）数目明显高于对照组,OGD+GdCl3组中O4+/CaSR+OPCs数目明显高于对照组及OGD组,OGD+CaSR沉默组中O4+/CaSR+OPCs数目明显低于对照组及OGD组,差异均有统计学意义（P＆0.05）。结论 CaSR过表达可进一步促进脑白质祖细胞增殖及分化为OPCs。