凋亡调控因子在凝血酶诱导海马神经元凋亡中的变化

摘要

目的探讨凝血酶（TM）对海马神经元凋亡调控因子Bcl-2、Bax及c-jun氨基末端激酶（JNK）表达的影响,阐明TM诱导凋亡的机制。方法海马神经元经40 U/mL TM作用0 h、6 h、12 h、24 h、48 h、72 h后终止培养,应用免疫细胞化学方法检测Bcl-2及Bax蛋白表达,Western blot检测磷酸化JNK（P-JNK）及JNK蛋白表达。结果TM作用6 h后,Bcl-2蛋白表达增加,12 h后开始下降,到48 h达到最低值（P＜0.01）,72 h后Bcl-2蛋白表达开始回升。TM作用6 h后,Bax蛋白表达增加,随作用时间的延长,Bax蛋白表达水平逐渐上升,到48 h达到最高值（P＜0.01）。Bcl-2/Bax比值逐渐降低,在48 h达最低。TM作用0 h时P-JNK蛋白无表达,6 h后开始表达,与0 h组比较差异存在显著性（P＜0.01）,12 h时达高峰（P＜0.01）,并持续到24 h,48 h后逐渐降低。0 h组可见有少量JNK蛋白表达,6 h后JNK蛋白表达显著增加（P＜0.01）,随TM作用时间的延长,JNK蛋白表达无明显变化。结论TM可能是通过抑制Bcl-2的表达,增强Bax的表达,降低Bcl-2和Bax的比值,激活JNK信号传导通路导致海马神经元凋亡。