星形胶质细胞体外缺血缺氧损伤后炎症模型的建立及应用

摘要

目的建立SD大鼠星形胶质细胞缺血缺氧损伤后炎症模型,探讨亚低温对星形胶质细胞缺血缺氧及损伤后炎症反应的影响。方法体外原代培养新生SD大鼠星形胶质细胞,免疫荧光染色检测胶质纤维酸性蛋白（GFAP）进行鉴定。实验分正常对照组（C组）、单纯缺氧组（H组）和缺氧+白细胞组（H+W组）,以无糖DMEM培养基、5%CO2+95%N2混合气体培养4h诱导细胞缺氧模型,H+W组加入1 mL SD大鼠外周血白细胞（1×10~6/mL）,C组加入等量培养液。将3组细胞分别置入37℃、34℃、32℃、30℃CO2孵箱中作用24 h,应用速率法和LIVE/DEAD染色分别检测3组细胞在不同温度下乳酸脱氢酶（LDH）释放率的变化和形态学变化。结果缺氧4 h即可造成星形胶质细胞的损伤,37℃时C组、H组、H+W组细胞LDH释放率依次升高,差异有统计学意义（P＜0.05）;与37℃相比,亚低温状态（34℃、32℃）下H组、H+W组细胞LDH释放率均降低;但在30℃时,则有明显升高,与32℃相比差异具统计学意义（P＜0.05）。结论亚低温状态可明显降低星形胶质细胞的缺血缺氧性损伤及炎症性损伤,其机制可能并非通过单纯的抑制代谢来实现的。