促红细胞生成素对Aβ25-35诱导的细胞tau蛋白磷酸化的抑制作用

摘要

目的探讨促红细胞生成素（Epo）对凝聚态β淀粉样蛋白25-35片断(Aβ25-35)诱导的SH-SY5Y细胞tau蛋白磷酸化的影响。方法 MTT法观察不同浓度的Epo（0、5、10、20、50U）单独作用24h对SH-SY5Y细胞存活率的影响;20μmol/L的凝聚态Aβ25-35作用于SH-SY5Y细胞不同时间点（0 min、30 min、1 h、3 h、6 h、12 h、24 h）后,Western blot法检测tau蛋白磷酸化（Ser199、Ser396及taul）水平的变化;观察不同浓度的Epo（5、10、20 U）预处理细胞3 h后对Aβ25-35作用的影响以及PI3K/Akt抑制剂LY294002（50μmol/L）预处理细胞1h后Epo抑制作用受到的影响。结果不同浓度的Epo作用24h后,MTT示细胞存活率无明显变化。20 μmol/L的Aβ25-35作用不同时间点后,tau蛋白Ser396、Ser199位点的磷酸化水平3h时开始增加,6h达到最高峰,12h后又逐渐下降,24h时仍维持较高水平,与0min、30min时比较,差异均有统计学意义（P＜0.05）;而总的tau蛋白没有任何变化。5、10、20U Epo预处理均可有效地抑制Aβ25-35引起的Ser396、Ser199位点的磷酸化,与正常对照组比较,差异均有统计学意义（P＜0.05）。LY294002预处理细胞后,Epo的作用受到抑制。结论 Epo可通过PI3K/Akt途径对Aβ25-35诱导的tau蛋白磷酸化发挥抑制作用,本研究为研究AD的发病机制及探索新的有效治疗药物提供了重要的理论基础。