尿激酶型纤溶酶原激活物对高糖诱导大鼠系膜细胞增殖及表型转化的影响及其机制

摘要

目的通过体外培养大鼠系膜细胞（MC）,观察尿激酶型纤溶酶原激活物（uPA）对高糖环境下MC增殖及表型转化的影响及其可能的信号转导机制。方法体外培养大鼠MC,分为4组:对照组、高糖组、高糖+渥曼青霉素组、高糖+uPA组。MTT法检测各组MC增殖情况。流式细胞仪分析各组MC细胞周期改变。Western印迹法检测各组MC表达CDK2与p27kipl变化,并测定MC中信号蛋白Akt的活性。激光共聚焦显微镜检测各组MC中α-SMA表达方式及表达量变化。结果培养24 h后高糖组MC增殖程度较对照组显著增加（P＜0.01）,渥曼青霉素与uPA组可明显抑制细胞增殖（P＜0.01）。高糖刺激Akt活性,渥曼青霉素与uPA组Akt活性均较高糖组显著降低（均P＜0.01）。高糖组MC培养24 h后,p27Kipl蛋白表达较对照组显著减少（P＜0.01）;高糖+渥曼青霉素组、高糖+uPA组p27Kipl蛋白表达均较高糖组显著增加（均P＜0.01）;各组CDK2蛋白表达无明显变化。高糖组MC培养24 h后,胞质中α-SMA表达较对照组显著增加（P＜0.01）,并在核周出现聚集;高糖+渥曼青霉素组、高糖+uPA组α-SMA表达量均较高糖组显著减少（均P＜0.01）,其分布与对照组无显著差异。结论 uPA可能通过抑制Akt信号分子活性,上调p27Kipl表达,拮抗高糖所致MC增殖与表型转化。