高压氧联合阿霉素对阿霉素耐药神经胶质瘤细胞株U87敏感性的影响及其分子机制

摘要

目的 探讨高压氧（HBO）联合阿霉素（ADR）对ADR耐药神经胶质瘤细胞株U87（U87/ADR）敏感性的影响及其分子机制。方法 建立ADR耐药神经胶质瘤U87细胞（U87/ADR）株；按照实验设计分成4组,对照组、ADR组、HBO组、HBO＋ADR组。用MTT实验检测HBO＋ADR对U87/ADR细胞增殖能力的影响；利用Annexin V-FITC/PI双染法和流式细胞术检测HBO＋ADR对U87/ADR细胞凋亡的影响；利用Western blotting检测U87/ADR细胞凋亡相关蛋白及JNK通路蛋白的表达水平。结果 ADR浓度为40、60、80 μg/ml时,HBO＋ADR能够有效逆转U87/ADR细胞对ADR耐药作用（P＆0.01）；Hochest33324染色实验显示蓝色荧光强度显著升高,细胞核由于浓集而呈亮蓝色,细胞呈明显凋亡形态；流式细胞术和凋亡蛋白的检测结果进一步表明,HBO＋ADR后促进U87/ADR细胞凋亡率（P＆0.01）；HBO＋ADR可激活JNK信号通路并抑制U87/ADR细胞中P-gp、MRP蛋白的表达（P＆0.01）。结论 HBO与ADR联用增强U87/ADR细胞对ADR的敏感性并诱导细胞凋亡,其机制可能与联用HBO后调控JNK信号通路和耐药相关蛋白有关。