不同浓度的A-PRF膜萃取液对人牙龈成纤维细胞增殖及OPG表达的影响

摘要

目的比较不同浓度的富血小板纤维蛋白(A-PRF)膜萃取液对人牙龈成纤维细胞(HGF)增殖能力及骨保护素(OPG)表达的影响。方法将健康成人的牙龈依照组织块培养法进行传代,对其来源进行免疫荧光染色鉴定,取浓度0、10%、50%、100%的A-PRF提取液100μl分别加入到人牙龈成纤维细胞培养基内,标记为A组、B组、C组、D组,观察人牙龈成纤维细胞的生长密度与形态;用酶联免疫吸附剂测定(ELISA)检测OPG表达水平,并进行组间比较。结果利用组织块贴壁的培养方法培养HGF。在倒置相差显微镜下进行观察,可见HGF呈现梭形或者星形,细胞排列十分规则,呈束状或旋涡状。用免疫荧光染色法鉴别HGF组织的来源,抗角蛋白抗体染色结果无染色呈阴性,抗波形丝蛋白抗体染色呈现阳性,胞浆呈现荧光绿色,HGF的细胞有明显细长的伪足呈长梭形,胞核多呈椭圆形位于细胞的中央,照相记录HGF的细胞形态,证实本实验所培养的细胞为来源于中胚层的纤维母细胞,具有HGF的形态特点。随着A-PRF膜萃取液浓度的增高牙龈成纤维生长密度增加,细胞数量明显增多。HGF在低浓度的生长因子萃取液刺激的条件下,OPG表达水平随着萃取液浓度的增高而不断增加。经不同浓度A-PRF膜萃取液刺激后,A组、B组、C组、D组的OPG表达分别为(2490.69±255.94)、(3336.86±245.41)、(5434.33±256.56)、(6931.46±132.72)pg/ml,四组的OPG表达水平比较差异均具有统计学意义(P<0.05)。结论A-PRF膜萃取液能够很好的促进牙龈成纤维细胞的增殖,并且OPG的含量也相应有所增加,更加证实了A-PRF膜在促进牙龈组织愈合及骨组织愈合具有很好的贡献。