鲍曼不动杆菌临床分离株表型、基因型和耐药基因的对比研究

摘要

目的对比研究鲍曼不动杆菌临床分离株基因型和编码耐药基因的差异,并分析其与临床多重耐药性的关系。方法随机收集中南大学湘雅二医院2008年9月至2009年9月分离的77株鲍曼不动杆菌,采用WHO推荐的K-B法对鲍曼不动杆菌进行临床常见15种抗生素药物敏感试验,并对药敏谱进行分析。用随机扩增多态性DNA法（RAPD）技术进行基因分型。并利用PCR对β-内酰胺酶基因TEM-1、IMP、OXA-23、OXA-24、AmpC和氨基糖苷类修饰酶基因aac（3）-Ⅰ、aac（6′）-Ⅰ、ant（3″）-Ⅰ和16S rRNA甲基化基因arm4、rmtA、rmtB进行扩增及序列分析。对比分析鲍曼不动杆菌耐药基因的携带情况,以及与基因型和耐药性的关系。结果 77株鲍曼不动杆菌中敏感菌株有31株,对5种或5种以上抗生素耐药的多重耐药菌株46株,内含全耐药菌株10株。RAPD技术将其分为17型,为A-G型,多重耐药株中E型为优势克隆株（17株）,在重症监护病房（ICU）中流行最广,占47.1%（8/17）。敏感株中各型散在分布。PCR扩增结果显示,多重耐药株和敏感株携带TEM-1、IMP、OXA-23、OX4-24、AmpC、aac（3）-Ⅰ、aac（6′）-Ⅰ、ant（3″）-Ⅰ和armA耐药基因的比率分别为95.7%、39.1%、84.8%、54.3%、87.0%、89.1%、84.8%、45.7%、63.0%和58.1%、9.7%、32.3%、48.4%、48.4%、29.0%、45.2%、12.9%、9.7%,未发现rmtA和rmtB基因阳性菌株。经x~2检验,除OXA-24外,其余各耐药基因携带率比较差异有统计学意义（P＜0.05）。药敏分析提示携带以上耐药基因的鲍曼不动杆菌菌株的耐药率明显高于未携带该基因的菌株,其中对阿米卡星和庆大霉素耐药的菌株,其氨基糖苷类酶基因均阳性（34.8%）,含所测的所有β-内酰胺酶基因的菌株均为全耐药株。结论与临床分离的敏感鲍曼不动杆菌相比,多重耐药株耐药谱广,耐药率高,其携带β-内酰胺酶基因和氨基糖苷类酶基因种类多,分离率高,且同一克隆的多重耐药株可在病室内和病室间传播。