小鼠趋化素样因子超家族成员1cDNA的克隆化和鉴定

摘要

目的为了研究人趋化素样因子超家族成员1(CKLFSF1)的基因进化,并为其开展动物实验研究提供基础,本文进行了小鼠趋化素样因子超家族成员1(Cklfsf1)cDNA的克隆化.方法利用生物信息学、PCR、DNA测序等方法克隆Cklfsf1,利用RT-PCR、Northern Blot和激光显微切割(LCM)等手段研究Cklfsf1的正常组织表达谱、睾丸组织不同细胞表达谱.结果成功地克隆了Cklfsf1编码区序列,并鉴定了3个变异体,均在GenBank进行了登录,分别命名为:Cklfsf1-v1,v2,v3.Cklfsf1-v1、v2、v3与CKLFSF1-v17在氨基酸水平的一致性根据BlastP程序分别为16/35、没有显著相似性、58/145.Northern Blot显示Cklfsf1在睾丸组织高表达,在其它组织检测不到阳性信号.激光显微切割(LCM)RT-PCR结果显示Cklfsf1表达于睾丸组织的初级和次级精母细胞.结论小鼠Cklfsf1与人CKLFSF1在序列、结构特征、染色体定位、表达谱等方面均有相似性,表明人类CKLFSF1基因在进化上至少可以上溯到小鼠,可以利用小鼠模型研究CKLFSF1的功能.