细菌DNA的聚合酶链反应扩增及反相杂交初步分型

摘要

目的探讨聚合酶链反应(PCR)加反相杂交技术在细菌DNA检测中的应用.方法以16SrRNA基因为靶序列,设计引物及寡核苷酸探针,采用PCR法加反相杂交检测标准菌株及临床标本的细菌DNA.结果对24株不同标准菌株进行PCR扩增,均出现371 bp长度的DNA片段,敏感性试验可检测出10-12 g的细菌DNA,与人类基因组DNA、真菌及病毒无交叉反应;22例血培养阳性标本及4例脑脊液培养阳性标本均扩增出371 bp长度DNA条带,反相杂交法区分革兰阳性/阴性细菌与培养结果相符.结论 16SrRNA基因PCR加反相杂交技术检测细菌DNA,具有特异、敏感、快速、准确的特点,为细菌感染的临床诊断提供了科学的依据.