耐吡嗪酰胺结核分枝杆菌基因突变研究

摘要

目的研究吡嗪酰胺酶编码基因 pncA 突变与结核分枝杆菌吡嗪酰胺（pyrazinamide,PZA）耐药的关系。方法将临床分离的36株结核分枝杆菌进行常规 PZA 药敏试验和 pncA 基因序列分析。采用绝对浓度法进行 PZA 药敏试验;PCR 扩增 pncA 基因及其上游、下游碱基序列,纯化回收 PCR 产物克隆到 T 载体并进行全自动测序。结果36株临床分离株中25株 PZA 耐药,11株 PZA敏感。5株高耐 PZA（PZA 浓度为250μg/ml）临床分离株4株 pncA 基因突变;20株低耐 PZA（PZA浓度为50μg/ml）6株 pncA 基因突变;25株耐 PZA 结核分枝杆菌 pncA 基因突变率为40.0%。3株PZA 敏感临床分离株 pncA 基因出现突变、其中2株为同义突变。11株耐 PZA 结核分枝杆菌 pncA 基因上游调控序列突变,其中5株同时有 pncA 基因突变;2株 PZA 敏感结核分枝杆菌 pncA 基因上游序列突变。结论 pncA 基因突变可引起结核分枝杆菌对 PZA 耐药,但 pncA 基因突变只是结核分枝杆菌耐 PZA 的一种机制,可能还存在 PZA 的其他耐药机制。