基于Rock2信号通路探讨黄芩苷对阿尔茨海默病小鼠学习记忆功能的影响

摘要

目的构建阿尔茨海默病模型淀粉样前体蛋白(APP)及早老素-1(PS1)双转基因小鼠,观察黄芩苷对小鼠学习记忆功能改善的影响。方法体内实验将APP/PS1转基因小鼠分为模型组与黄芩苷组,同时将野生型小鼠作为对照组。黄芩苷组连续灌胃给药28 d,剂量60 mg/kg,其他两组灌胃等体积生理盐水。之后进行为期6 d的水迷宫实验。麻醉小鼠检测海马区兴奋性突触后电位。结束后处死小鼠,分离脑组织进行免疫组化染色,蛋白免疫印迹法(Western Blot)检测相关蛋白。体外实验应用PC12细胞,首先检测不同剂量β-淀粉样蛋白(Aβ)25-35对PC12细胞存活率的影响,再检测黄芩苷对Aβ25-35干预PC12细胞存活率的改善作用。将PC12细胞分为对照组、模型组、黄芩苷组与黄芩苷+溶血磷脂酸组。采用免疫荧光检测Rock2表达,Western Blot检测Caspase-3等凋亡相关蛋白表达。结果体内实验中,与模型组比较,经黄芩苷治疗的APP/PS1小鼠逃避潜伏期降低(P<0.05),穿越平台次数与靶象限停留时间增加(P<0.05)。黄芩苷可提高小鼠长时程电位(P<0.05),减少海马组织Aβ蛋白沉积(P<0.05)。Western Blot检测结果显示,黄芩苷减少了海马组织Rock2蛋白与Cleaved-Caspase-3蛋白表达(P<0.05),提高了Bcl-2/Bax比例(P<0.05)。体外实验中,200μmol/L黄芩苷显著提高了30μmol/L Aβ25-35干预的PC12细胞存活率(P<0.05),抑制了Rho激酶(Rock2)蛋白与Cleaved-Caspase-3蛋白表达,提高Bcl-2/Bax比例(P<0.05)。溶血磷脂酸干预逆转了黄芩苷的作用,提高了Rock蛋白与Cleaved-Caspase-3蛋白表达,降低了Bcl-2/Bax比例。结论黄芩苷可治疗阿尔茨海默病,其机制是下调Rock2蛋白表达水平,减少Aβ沉积,减少细胞凋亡,提高长时程电位,改善小鼠学习与记忆功能障碍。