三氯乙烯诱导人角质形成细胞凋亡过程中caspase-8及caspase-9活力的变化

摘要

目的观察三氯乙烯（TCE）致入原代角质形成细胞（KC）损伤过程中caspase-8、caspase-9活力及细胞凋亡率的变化,探讨TCE引起KC凋亡的可能机制。方法体外培养的KC分别给予0.125、0.250、0.500、1.000和2.000 mmol/L的TCE染毒4、8、12、24 h,以100 μmol/L的caspase-9特异抑制剂Z-LEHD-FMK预处理细胞1 h,再用2.000 mmol/LTCE染毒12 h,MTF法检测细胞活力变化,分光光度法检测caspase-8及caspase-9活力变化,流式细胞仪检测细胞凋亡率变化。结果与空白对照相比,2.000和1.000 mmol/L TCE染毒组作用8 h后细胞活力降低,染毒超过12 h,各剂量组细胞活力均降低,差异有统计学意义（P＜0.05或P＜0.01）。在不同的时间段,各剂量组的caspase-8活力与对照组比较,差异无统计学意义（P＞0.05）。染毒8 h时,2.000 mmol/L TCE组caspase-9活力明显高于对照组,差异有统计学意义（P＜0.05）;12和24 h时,各剂量组caspase-9活力与对照组比较,差异均有统计学意义（P＜0.05或P＜0.01）。不同剂量的TCE染毒12 h后,2.000 mmol/L TCE染毒组细胞凋亡率升高至（80.43±4.21）%,空白对照组为（9.40±2.98）%,除0.125 mmol/L TCE组外,其他各染毒组的细胞凋亡率与对照组相比,差异均何统汁学意义（P＜0.05）,剂量-效应关系明显。Caspase-9抑制剂预处理组caspase-9活力及细胞凋亡率较2.000 mmol/L TCE染毒组明照降低.差异有统计学意义（P＜0.01）。结论 Caspase-9的活化在TCE诱导的体外培养的人KC的凋亡过程中发挥重要作用。