TNF-α/LTβ受体激动剂对小鼠皮肤成纤维细胞表达ICAM-1和VCAM-1的可能协同作用研究

摘要

目的:探讨TNF-α和LTβ受体联合活化对小鼠皮肤成纤维细胞表达ICAM-1和VCAM-1的影响。方法:胰酶、胶原酶两步消化法分离新生BALB/c小鼠皮肤成纤维细胞并在培养板中培养至稳定贴壁生长。细胞分为对照组、TNF-α处理组、LTβ受体激动剂(α-LTβR)处理组和TNF-α+α-LTβR联合处理组。处理不同时间点后,流式细胞术检测黏附分子ICAM-1和VCAM-1蛋白表达水平;荧光定量PCR方法检测ICAM-1和VCAM-1 mRNA表达水平。结果:TNF-α处理能够显著诱导ICAM-1和VCAM-1蛋白水平表达上调,双阳性细胞比例在处理24 h后达到高峰,随时间推移回落。单独α-LTβR处理仅引起二者表达轻微上调。联合处理组早期效应与TNF-α组一致,但在处理72 h后双阳性细胞比例高于TNF-α组(P<0.05)。三种处理方式均能在早期诱导ICAM-1和VCAM-1 mRNA表达上调,表达趋势具有时间依赖性。结论:TNF-α和α-LTβR联合刺激能够显著诱导小鼠皮肤成纤维细胞ICAM-1和VCAM-1表达上调,获得LTo表型。