线粒体凋亡途径在槲皮素诱导U937细胞凋亡中的作用研究

摘要

目的:观察槲皮素对人急性髓系白血病U937细胞增殖、凋亡、线粒体膜电位(△ψm)、人B细胞淋巴瘤因子-2、人Bcl-2相关X蛋白、细胞色素c表达及半胱氨酸蛋白酶-3、半胱氨酸蛋白酶-9活性的影响,探讨线粒体凋亡途径在槲皮素诱导U937细胞凋亡中的作用.方法:体外培养U937细胞,分别以0、10、20、40、80、160μmol/L浓度的槲皮素处理24、48和72 h,采用细胞计数试剂盒(Cell counting kit-8,CCK-8)检测槲皮素对U937细胞增殖的抑制作用;实验随机分为对照组(Control)、槲皮素10、20组和40μmol/L组.采用流式细胞仪AnnexinV-FITC/PI双染法检测U937细胞凋亡情况;采用荧光染料3,3'-二己基含氧碳菁碘代物[3,3'-dihexyloxacarbocyanine iodide,DiOC6(3)]染色,流式细胞仪检测U937细胞△ψm的变化;采用Western blot检测U937细胞Bcl-2、Bax、Cytc表达;采用比色法检测U937细胞Caspase-3、Caspase-9活性.结果:槲皮素可抑制U937细胞的增殖,抑制率显著升高,且呈时间-剂量依赖性.槲皮素亦可显著抑制U937细胞凋亡率,与对照组比较(P<0.01).槲皮素显著降低U937细胞△ψm,与对照组比较(P<0.01).槲皮素显著下调U937细胞Bcl-2表达,上调Bax表达,下调Bcl-2/Bax比值及上调Cyt c表达,与对照组比较(P<0.01).槲皮素显著升高U937细胞Caspase-3、Caspase-9活性,与对照组比较(P<0.01).结论:槲皮素可显著抑制U937细胞增殖,线粒体凋亡途径激活是槲皮素诱导U937细胞凋亡的途径之一.