抗CD3单克隆抗体重、轻链可变区基因的克隆及序列分析

摘要

目的:抗CD3单克隆抗体(WuT3)可变区基因克隆及序列分析.方法:采用RT-PCR技术,从WuT3杂交瘤细胞总RNA中扩增VH、VL片段,经酶切后通过链接反应构建重组克隆载体,测序鉴定.结果:通过国际联机检索发现VH、VL基因与Ig同源,分别符合小鼠IgVH、Vκ基因特征.VH基因属于鼠重链VH第IIB亚类,全长363 bp,可编码121个氨基酸;VL基因属于鼠κ轻链第III亚类,全长330 bp,可编码110个氨基酸.结论:成功获得WuT3单抗的重、轻链可变区基因.