蛋白激酶C及转化生长因子β1信号通路对肝星状细胞激活的影响

摘要

目的探讨蛋白激酶C（PKC）活性改变对HSC表达TGFβ1的影响及在HSC激活中的作用。方法将肝星状细胞系rHSC-99分为3组:对照组（A组）,PKC激动剂佛波酯0.5μmol/L组（B组）,PKC抑制剂Calphostin C 100nmol/L组（C组）。加药后0、3、6、12h和24h分别检测各组细胞PKC活性的变化;作用24h后,采用Western blot和RT-PCR方法检测各组细胞TGFβ1,Smad 4,Ⅰ、Ⅲ型胶原和α-平滑肌肌动蛋白的表达;采用MTT法检测细胞的增殖情况。结果佛波酯作用后PKC的活性显著增强,而Calphostin C则抑制PKC的活性。PKC活性增强后,与对照组相比TGFβ1及其下游信号分子Smad 4的表达分别升高了4.8倍和13.1倍（P＜0.01）;HSC的Ⅰ、Ⅲ型胶原和α-平滑肌肌动蛋白的表达分别升高了2.4倍、1.8倍和1.3倍（P＜0.01）,并促进HSC的增殖;PKC活性被抑制后则能抑制以上作用。结论PKC活性的改变能调控HSC中TGFβ1的表达,在HSC的激活中发挥调节作用。