人抗HBV-前S2抗体轻链基因的克隆及序列分析

摘要

目的获得人源性乙型肝炎病毒前Ｓ２抗体轻链基因。方法用人工合成的乙型肝炎病毒前Ｓ２短肽（Ｐｒｅ－Ｓ２，１２０—１４５），从已构建的人源性噬菌体抗体库中，得到了针对Ｐｒｅ－Ｓ２阳性克隆，经竞争抑制实验证明其特异性和活性，合成一对轻链引物，经ＰＣＲ扩增，亚克隆入质粒ＰＵＣ１８进行序列测定及分析、结果筛选到的阳性克隆具有乙型肝炎病毒前Ｓ２特异性亲和力。构建了ｐＵＣ１８－ Ｐｒｅ－Ｓ２ｋ。轻链重组质粒，序列分析其为人ｋ轻链，包括了完整的恒定区和可变区，大小为 ６４５ ｂｐ。结论利用抗原抗体特异性反应原理，从人源性噬菌体抗体库中筛选到人抗ＨＢＶ前Ｓ２抗体ｋ轻链