多重PCR法检测初诊成人急性淋巴细胞白血病患者克隆性免疫球蛋白和T细胞受体基因重排

摘要

目的应用多重 PCR 方法检测初诊成人急性淋巴细胞白血病（ALL）患者的克隆性免疫球蛋白（Ig）和 T 细胞受体（TCR）基因重排,为实时定量 RT-PCR（RQ-PCR）法监测 ALL 患者体内的微量残留病（MRD）奠定基础。方法参照 BIOMED-2协作组制定的 Ig 和（或）TCR 检测方法,设计96条不同的 PCR 引物,分成14个混合管,通过多重 PCR,分别检测患者骨髓单个核细胞的 IgH、IgK、TCRB、TCRG、TCRD 克隆性基因重排。结果在22例成人 B 系 ALL 患者中,Ig 克隆性重排检出率为96%,其中 IgH 为86%,IgK 为14%。在18例成人 T 系 ALL 患者中,TCR 克隆性重排检出率为100%,其中 TCRB 为83%,TCRG 为78%,TCRD 为39%。两个及两个以上克隆性标志物的检出率在 B 和 T系 ALL 中分别为91%（22例中20例）和89%（18例中16例）.结论 BIOMED-2协作组设计的14管多重 PCR 引物和方法,几乎可检测到淋巴细胞白血病患者体内所有占优势的克隆性 T、B 细胞增殖群体,方法简便、可靠、覆盖面广,适用于成人 ALL 患者基因重排检测和 MRD 监测。