鸡骨草不同提取部位体外抗肿瘤活性筛选

摘要

目的阐明鸡骨草体外抗肿瘤活性及明确其活性部位。方法广西鸡骨草全草乙醇提取物经石油醚、乙酸乙酯、正丁醇、水萃取后,采用CCK-8法检测不同浓度的鸡骨草石油醚部位、乙酸乙酯部位、正丁醇部位和水部位体外对3种肿瘤细胞株生长的抑制作用及对肿瘤细胞形态的影响,从而确定抗肿瘤活性部位;通过Hoechst33258荧光染色法检测细胞凋亡形态来评价鸡骨草乙酸乙酯部位BEL-7404肿瘤细胞凋亡的影响。流式细胞术检测鸡骨草乙酸乙酯提取物对BEL-7404肿瘤细胞周期的影响;膜联蛋白V-异硫氰酸荧光素(Annexin V-FITC)/碘化丙啶(PI)检测鸡骨草乙酸乙酯提取物对BEL-7404肿瘤细胞凋亡的影响。结果4种提取物均具有与浓度相关的体外抗肿瘤作用(P鸡骨草正丁醇提取物>鸡骨草水提取物>鸡骨草石油醚提取物,鸡骨草乙酸乙酯部位、正丁醇部位、水部位对上述3种肿瘤细胞的生长均有不同程度的抑制作用,且均能显著改变细胞形态,其中乙酸乙酯提取物作用最强;而鸡骨草石油醚提取物对上述3种细胞株生长抑制作用最弱,对细胞形态的改变较小。Hoechst33258染色结果显示鸡骨草乙酸乙酯部位能促进BEL-7404肿瘤细胞的凋亡;流式结果显示,随着鸡骨草乙酸乙酯提取物浓度的增加,G0/G1期细胞比例显著增加(P<0.05),G2/M期细胞比例显著下降,细胞凋亡率明显增加(P<0.05)。结论鸡骨草具有抑制肿瘤细胞增殖作用,其主要有效成分集中在乙酸乙酯部位。鸡骨草乙酸乙酯萃取部位可能通过阻滞BEL-7404细胞周期于G0/G1期和诱导肿瘤细胞凋亡来抑制BEL-7404肿瘤细胞的增殖。