敛肝熄风止颤方对帕金森病大鼠内质网应激相关蛋白的影响

摘要

目的观察敛肝熄风止颤方对6-羟基多巴胺(OHDA)诱导的帕金森病(PD)模型大鼠黑质内质网应激相关蛋白的影响,探讨其对PD模型大鼠的神经保护作用及可能机制。方法100只SD大鼠随机分为假手术组15只,造模组85只,采用6-OHDA脑左侧纹状体注射制备PD模型,将成模的60只大鼠随机分为模型组、敛肝熄风止颤方低、中、高剂量组(简称低、中、高剂量组)。低、中、高剂量组分别给予低、中、高剂量(0.36、0.72、1.44 g/kg)敛肝熄风止颤方水煎剂灌胃处理4 w,假手术组及模型组用等容积生理盐水灌胃。采用苏木素-伊红(HE)染色检测脑黑质神经细胞形态学,Western印迹检测脑黑质葡萄糖调节蛋白(GRP)78、钙蛋白酶(calpain)、半胱氨酸蛋白酶(Caspase)-12相关蛋白表达情况;逆转录(RT)-聚合酶链反应(PCR)检测脑黑质GRP78、calpain、Caspase-12基因表达。结果HE染色结果表明,假手术组脑黑质神经元数目较多,形态结构基本正常;模型组神经元形态与结构明显损伤,数量明显减少。与模型组比较,中、高剂量组神经细胞数目明显增多,形态结构改善。与假手术组比较,模型组及低剂量组脑黑质GRP78、calpain、Caspase-12蛋白及mRNA的表达均明显增高(P<0.01,P<0.05);与模型组比较,中、高剂量组GRP78、calpain、Caspase-12蛋白及mRNA的表达明显下降(P<0.05,P<0.01),而低剂量组仅calpain蛋白及mRNA的表达明显下降(P<0.05)。结论敛肝熄风止颤方可能通过抑制PD模型大鼠中脑黑质神经细胞内质网应激,对PD产生神经保护作用。