长链非编码RNA SOX2-OT通过靶基因miR-143-3p调控鼻咽癌增殖、迁移、侵袭及细胞周期的分子机制

摘要

目的探讨长链非编码RNA SOX2-OT(LncRNA SOX2-OT)对鼻咽癌细胞增殖、迁移、侵袭及细胞周期的影响及其作用机制。方法体外培养永生化鼻咽上皮细胞NP69与鼻咽癌细胞系6-10B、HNE-3、C666-1。采用实时荧光定量聚合酶链反应(qRT-PCR)检测SOX2-OT与微小RNA-143-3p(miR-143-3p)的表达量;利用脂质体转染法分别将si-con、si-SOX2-OT、miR-con、miR-143-3p mimics、si-SOX2-OT与anti-miR-con、si-SOX2-OT与anti-miR-143-3p转染至HNE-3细胞。二苯基四氮唑溴盐(MTT)检测细胞增殖率;应用流式细胞仪检测细胞周期;Transwell小室实验检测细胞迁移及侵袭;双荧光素酶报告实验验证SOX2-OT与miR-143-3p的靶向关系;Western印迹检测增殖标记蛋白细胞增殖核抗原(Ki)-67、细胞周期依赖蛋白激酶(CDK)2、基质金属蛋白酶(MMP)-2、MMP-9的表达量。结果SOX2-OT在鼻咽癌细胞中表达量明显升高,miR-143-3p的表达明显降低(P<0.05);转染si-SOX2-OT与miR-143-3p mimics可明显降低细胞增殖率、S期细胞比例及Ki-67、CDK2、MMP-2、MMP-9蛋白水平,提高G1期细胞比例,减少迁移及侵袭细胞数(均P<0.05);双荧光素酶报告实验证实SOX2-OT能够靶向结合miR-143-3p;共转染si-SOX2-OT与anti-miR-143-3p可明显降低转染si-SOX2-OT对细胞增殖、迁移及侵袭的作用。结论LncRNA SOX2-OT靶向调控miR-143-3p表达从而促进鼻咽癌增殖、迁移及侵袭,促进细胞周期进展,并可能作为鼻咽癌诊断及治疗的潜在靶点。