过表达miR-30b-3p靶向CXCL16对H_(2)O_(2)诱导的血管内皮细胞氧化应激和凋亡的影响

摘要

目的探讨miR-30b-3p对H_(2)O_(2)诱导的脐静脉血管内皮细胞氧化应激和凋亡的影响及调控机制。方法 H_(2)O_(2)诱导损伤EVC-304细胞,qRT-PCR检测细胞中miR-30b-3p和CXCL16 mRNA水平,Western印迹检测血清CXC趋化因子配体(CXCL)16蛋白水平。构建miR-30b-3p过表达或CXCL16表达抑制的EVC-304细胞,H_(2)O_(2)诱导其损伤后,酶联免疫吸附试验检测细胞中丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)和谷胱甘肽过氧化物还原酶(GSH-Px)水平,流式细胞仪检测细胞凋亡率,Western印迹检测B细胞淋巴瘤(Bcl)-2、Bcl-2相关X蛋白(Bax)和酶切谷半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶(caspase)3水平。双荧光素酶报告基因实验验证miR-30b-3p与CXCL16之间靶向调控关系。结果 H_(2)O_(2)可显著降低EVC-304细胞中miR-30b-3p、SOD和GSH-Px水平、Bcl-2蛋白水平,提高MDA水平、凋亡率、Bax和酶切caspase3蛋白水平(P<0.05)。过表达miR-30b-3p或抑制CXCL16表达显著提高H_(2)O_(2)诱导的EVC-304细胞中SOD和GSH-Px水平、Bcl-2蛋白水平,显著降低MDA水平、凋亡率、Bax和酶切caspase3蛋白水平(P<0.05)。miR-30b-3p负调控CXCL16表达,过表达CXCL16逆转了过表达miR-30b-3p对EVC-304细胞氧化应激和凋亡的影响。结论过表达miR-30b-3p通过靶向CXCL16降低了H_(2)O_(2)诱导的血管内皮细胞氧化应激和凋亡。