miR-16-5p下调ACE对高糖作用的肾小管上皮细胞增殖、凋亡的影响

摘要

目的 探讨miR-16-5p对高糖诱导的肾小管上皮细胞增殖、凋亡的影响及作用机制.方法 培养人肾小管上皮细胞,分为对照组和高糖组,对照组用葡萄糖浓度为5.5 mmol/L的培养液培养,高糖组用葡萄糖浓度为25 mmol/L的培养液培养;将miR-NC组(转染miR-NC)、miR-16-5p组(转染miR-16-5p mimics)、anti-miR-NC组(转染anti-miR-NC)、anti-miR-16-5p组(转染anti-miR-16-5p)、si-NC组(转染si-NC)、si-ACE组(转染si-ACE)、miR-16-5p+pcDNA3.1组(共转染miR-16-5p和pcDNA3.1)、miR-16-5p+pcDNA3.1-ACE组(共转染miR-16-5p和pcDNA3.1-ACE)、miR-NC+WT-ACE组(共转染miR-NC和WT-ACE)、miR-NC+MUT-ACE组(共转染miR-NC和MUT-ACE)、miR-16-5p+WT-ACE组(共转染miR-16-5p和WT-ACE)、miR-16-5p+MUT-ACE组(共转染miR-16-5p和MUT-ACE)均用脂质体法转染至肾小管上皮细胞中,si-NC组、si-ACE组、miR-NC组、miR-16-5p组、miR-16-5p+pcDNA3.1组、miR-16-5p+pcDNA3.1-ACE组转染后用25 mmol/L的葡萄糖培养液培养.运用qRT-PCR检测肾小管上皮细胞中miR-16-5p的表达水平;Western印迹法检测蛋白表达;MMT法检测细胞增殖活性;流式细胞术检测细胞凋亡;双荧光素酶报告基因检测实验检测细胞的荧光活性.结果 相较于对照组,高糖组细胞中miR-16-5p的表达水平显著下降;高糖抑制了HK-2细胞增殖,诱导HK-2细胞凋亡.miR-16-5p靶向调控ACE的表达;过表达miR-16-5p和抑制ACE均可抑制高糖诱导的肾小管上皮细胞凋亡和促进细胞增殖.过表达ACE能逆转miR-16-5p对高糖诱导的HK-2细胞凋亡抑制和增殖促进作用.结论 miR-16-5p可抑制高糖诱导的肾小管上皮细胞凋亡,促进细胞增殖,保护高糖诱导的HK-2细胞损伤,其机制可能与ACE的表达有关,将可为高糖引起的肾小管相关疾病的预防和治疗提供新思路和新靶点.