ATF-4过表达对HepG2细胞脂质从头合成的影响

摘要

目的 观察内质网应激相关因子激活转录因子(ATF)4过表达对肝细胞脂质从头合成通路的影响.方法转染针对HepG细胞ATF-4 siRNA的过表达质粒,分为未转染组、阴性对照组、ATF-4上调组(ATF-4+组),测定各组HepG2细胞内三酰甘油水平,油红O染色观察细胞脂质沉积,检测各组肝脏脂质从头合成上游转录因子固醇调节元素结合蛋白(SREBP)-1c及下游脂质合成的关键酶乙酰辅酶A羧化酶(ACC)、脂肪酸合成酶(FAS)、硬酯酰辅酶A去饱和酶(SCD)-1的基因水平,并检测ACC、FAS、SCD-1的蛋白表达水平.结果ATF-4+组ATF-4的表达水平比未转染组、阴性对照组显著升高(P<0.01);ATF-4+组较阴性对照组TG升高40％(P<0.01),油红O染色示脂滴明显增多.ATF-4+组SREBP-1c基因表达显著增加(P<0.05),ACC、FAS、SCD-1的基因表达显著增加(均P<0.01),ACC、FAS、SCD-1的蛋白表达增加(均P<0.05).结论ATF-4过表达可引起HepG2细胞三酰甘油沉积,并引起脂质从头合成通路激活,提示ATF4通过刺激脂质从头合成通路而在肝脏脂质沉积中发挥作用.