热休克条件下诱导型HSP70对人胚肺二倍体细胞衰老影响实验研究

摘要

目的 探讨在热休克条件下,人胚肺二倍体细胞MRC-5株诱导型热休克蛋白70(HSP70)在细胞水平的表达机制,诱导型HSP70 对MRC-5细胞衰老有无影响及影响MRC-5细胞衰老的相关机制.方法 用热休克处理诱导MRC-5细胞HSP70的表达,同时采用HSP70反义寡核苷酸转染MRC-5细胞作对照,分别置42℃恒温水浴30 min、1、2、4 h,及每日水浴1 h 共3和5 d,各组细胞均在37℃复温.分别测定细胞HSP70的表达,细胞超氧化物歧化酶(SOD)总活力,并通过衰老相关β-半乳糖苷酶(SA-β-Gal)染色和显微镜观察判断衰老细胞.结果 在42℃热休克处理下,MRC-5细胞HSP70的表达随热处理时间延长而增加(P＜0.05),且均高于同时点对照组水平(P＜0.05);MRC-5细胞SOD总活力随热处理时间延长而增高,均高于同时间点对照组水平,差异有统计学意义(P＜0.05);经HSP70反义寡核苷酸处理的细胞,在反复热处理第3天及第5天,SA-β-Gal染色阳性表达率高于实验组.结论 热处理方法可成功诱导MRC-5细胞表达HSP70,随热处理时间延长,MRC-5细胞HSP70表达增加,HSP70可能通过增强细胞内源性抗氧自由基能力,影响MRC-5细胞的衰老进程.