零下非结冰保存L-02细胞的效果及与细胞凋亡的关系

摘要

目的 采用UW液零下非结冰(-0.8℃)保存生物人工肝用L-02细胞,与常规低温(4℃及0℃)比较,探索零下非结冰保存肝细胞的效果以及同细胞凋亡的关系.方法 制备好的UW液保存的L-02细胞悬液分为3组:-0.8℃组(零下非结冰组),0℃组(0℃非结冰组),4℃组(对照组).低温保存24 h、48 h及72 h后,分别测定细胞存活率及凋亡率(流式细胞术)、LDH释放、尿素合成功能、白蛋白分泌功能.结果 零下非结冰(-0.8℃)较常规低温(0℃及4℃)明显提高了低温保存L-02细胞的存活率[72 h:-0.8℃(70.17±2.82)% vs 4℃(60.05±3.17)%],降低了细胞凋亡率[72 h:-0.8℃(5.73±1.68)% vs 4℃(9.20±2.35)%].零下非结冰明显抑制了LDH的释放[72 h:-0.8℃(113.88±5.64)U/L vs 4℃(170.47±11.80)U/L],更好地维持了L-02细胞的尿素合成功能[72 h:-0.8℃(1.01±0.14)mmol/L vs 4℃(0.66±0.09)mmol/L]及白蛋白分泌功能[72 h:-0.8℃(9.04±0.53)μg/ml vs 4℃(7.70±0.52)μg/ml].结论 与0℃及4℃相比,零下非结冰(-0.8℃)可明显提高L-02细胞存活率,降低低温损伤引起的细胞凋亡,有效的保护肝细胞尿素合成功能和白蛋白分泌功能.