快速老化痴呆小鼠快速衰老与避免肿瘤发生的关系探讨

摘要

目的探讨p53对热休克蛋白Hsp84、Hsp86的调控作用及二者间功能失衡与快速老化痴呆小鼠（SAMP8）发生快速衰老、避免肿瘤发生的相关性。方法采用实时荧光定量PCR（RT-qPCR）和免疫印迹（Western blot）法检测SAMP8及其正常对照小鼠（SAMR1）海马组织中Hsp84和Hsp86 mRNA和蛋白、p53通路相关蛋白MDM2和p21的表达。采用20 μmol/L β淀粉样肽25-35（Aβ25-35）处理小鼠脑神经瘤（Neuro-2a）细胞, 构建阿尔茨海默病（AD）细胞模型, qPCR法检测其中p53、Hsp84和Hsp86 mRNA水平。将p53 siRNA及pHsp84-Luc或pHsp86-Luc质粒共转染Neuro-2a细胞, 20 μmol/L Aβ25-35处理后, 多功能酶标仪检测荧光强度。将pcDNA3.1-p53或pcDNA3.1-p53DD、pHsp84-Luc或pHsp86-Luc质粒共转染Neuro-2a细胞, 20 μmol/L Aβ25-35处理后, 多功能酶标仪检测荧光强度。结果 SAMP8海马Hsp84和Hsp86 mRNA水平显著下降, 分别为SAMR1的13.51%和16.13%（均P＆0.01）。与SAMR1相比, SAMP8的Hsp84和Hsp86蛋白表达明显下降;而p53通路相关蛋白p21表达升高, MDM2表达下降（均P＆0.01）。AD细胞中p53 mRNA表达较正常细胞上升58%（P＆0.01）;而Hsp84和Hsp86 mRNA表达则较正常细胞分别下降32%和41%（均P＆0.05）。抑制p53表达导致AD细胞中Hsp84和Hsp86启动子活性呈浓度依赖性增高（均P＆0.05）;而促进p53表达导致Hsp84和Hsp86启动子活性呈浓度依赖性降低（均P＆0.05）。结论 p53负调控Hsp84和Hsp86的表达。SAMP8脑内衰老相关的p53/p21通路活性增强, 而Hsp90系统则处于抑制状态。二者功能的失衡可能是SAMP8发生快速老化进而避免肿瘤发生的部分原因。