GPX3基因甲基化是胰腺癌的潜在诊断标志物

摘要

目的 探讨谷胱甘肽过氧化物酶3(glutathione peroxidase 3,GPX3)基因启动子区在胰腺癌中的甲基化情况及其表达调控机制。方法 应用半定量RT-PCR、甲基化特异性PCR(methylation specific PCR,MPCR)和硫化测序(bisulfite sequencing,BSSQ)技术对6株人胰腺癌细胞系(PANC-1、PANC3.11、MIAPaCa-2、SW1990、AsPC-1和CFPAC-1)和153例胰腺癌组织进行分析。结果GPX3在PANC-1、PANC3.11和SW1990细胞中高表达,其启动子区呈现非甲基化状态;在CFPAC-1细胞中低表达,其启动子区呈现部分甲基化状态;在MIAPaCa-2和AsPC-1细胞中缺失表达,其启动子区呈现完全甲基化。应用去甲基化试剂5-aza处理后,PANC-1、PANC3.11和SW1990细胞中表达无变化,CFPAC-1细胞中表达增加,MIAPaCa-2和AsPC-1细胞中恢复表达。结果表明GPX3的表达受启动子区甲基化调控。BSSQ结果进一步验证了其在细胞系中的状态和MSP的扩增效率。GPX3在胰腺癌中的甲基化率为26.1%(40/153),GPX3甲基化与年龄、吸烟和肿瘤分化程度有相关性(P0.05),GPX3甲基化是胰腺癌诊断的潜在标志物。结论 GPX3在胰腺癌中频繁发生甲基化,其表达受启动子区甲基化调控。