乙型肝炎病毒前S2基因酵母表达载体的构建及表达

摘要

目的探讨乙型肝炎病毒(HBV)前S2蛋白的功能.方法以质粒pCP10(含有HBV ayw亚型全长序列)为模板,多聚酶链反应(PCR)扩增HBV前S2基因,克隆到pGEM-T载体中,测序鉴定、酶切后回收,与酵母表达质粒pGBKT7连接.将重组载体转化酵母细胞AH109,提取酵母蛋白质,进行十二烷基磺酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)和Western免疫印迹分析.结果成功构建HBV前S2基因酵母表达载体,Western免疫印迹显示HBV前S2蛋白在酵母细胞中表达,表达产物在胞内存在,分子量24kD左右.结论 HBV前S2蛋白在酵母细胞中表达成功.