快速高效分离纯化牛视网膜S抗原

摘要

目的寻找分离纯化牛视网膜Ｓ抗原的快速高效方法。方法选用ＤＥＡＥＳｅｐｈａｒｏｓｅＦａｓｔＦｌｏｗ（ＤＥＡＥＳｅｐｈａｒｏｓｅＦＦ）凝胶及自动层析系统一步层析快速提纯Ｓ抗原；聚丙烯酰胺凝胶电泳确定分子量；等电聚焦（ｉｓｏｅｌｅｃｔｒｉｃｆｏｃｕｓｉｎｇ，ＩＥＦ）电泳确定等电点；高效液相色谱（ｈｉｇｈｐｅｒｆｏｒｍａｎｃｅｌｉｑｕｉｄｃｈｒｏｍａｔｏｇｒａｐｈｙ，ＨＰＬＣ）确定纯度。结果Ｓ抗原波峰在ＮａＣｌ浓度为０．１４～０．２ｍｏｌ／Ｌ时被洗脱，每个视网膜能提纯３００～４００μｇＳ抗原。纯化Ｓ抗原的分子量为５５ｋＤａ，等电点为６．５５，ＨＰＬＣ分析显示单一波峰，保留时间为１１．５６ｍｉｎ。